Gránulos Metacromáticos. Coloración de Azul de Metileno de Löeffler. Coloración de Albert.
Algunas bacterias tienen la
capacidad de acumular gránulos de polifosfato, los cuales son reservas de
fosfato inorgánico que se pueden emplear en la síntesis de ATP (trifosfato de
adenosina o adenosin trifosfato). Dichos gránulos son conocidos a veces como
gránulos de volutina o gránulos metacromáticos
Se sospecha que los polifosfatos proporcionan
el fósforo y la energía que se requieren para la síntesis de los ácidos
nucleicos. La volutina tiene una afinidad destacable por los colorantes básicos
(azul de toluidina o azul de metileno), y de forma frecuente se presentan de
con un color distinto o más intenso que el del colorante aplicado
Para teñir gránulos metacromáticos
se pueden utilizar la coloración simple de azul de metileno de Löeffler o
la coloración de Albert.
Azul de metileno de Löeffler
Procedimiento
1.
Elabore un extendido de un cultivo (Corynebacterium
diphtheriae por ejemplo).
2.
Secar al aire.
3.
Fije el extendido a la llama del mechero.
4.
Cubra la lámina portaobjetos con solución alcohólica
de azul de metileno por cinco minutos.
5.
Lave la preparación con agua corriente.
6.
Escurra la lámina.
7.
Secar al aire.
8.
Observar con objetivo de inmersión.
Interpretación
Esta técnica es una coloración
simple en donde los gránulos metacromáticos aparecen de color azul intenso y el
resto de la bacteria de color azul claro
Reactivos utilizados en la coloración simple azul de
metileno de Löeffler
Agregar cero coma tres gramos de azul
de metileno, completar con 30 mililitros de etanol al 95% para disolver, una
vez disuelto, agregue 100 mililitros de agua destilada. Almacenar tapado de
forma apropiada en un frasco de vidrio
Coloración de Albert
Esta es otra coloración que se utiliza para teñir gránulos
metacromáticos.
Procedimiento
1.
Preparar el extendido.
2.
Fijar el extendido.
3.
Cubrir el portaobjeto con azul de
toluidina-verde metilo por diez minutos.
4.
Lavar con agua corriente.
5.
Escurrir.
6.
Aplicar Iodo (solución II) por cinco minutos.
7.
Lavar con agua corriente.
8.
Secar al aire o usar papel absorbente.
9.
Observar usando el objetivo de inmersión.
Interpretación
La tinción de Albert es una
coloración estructural que tiñe los gránulos metacromáticos de color azul
oscuro y el citoplasma bacteriano, de verde claro
Reactivos utilizados en la coloración estructural de
Albert
Para preparar la solución I se
deben utilizar: uno coma cinco gramos de azul de toluidina O, dos gramos de
verde de malaquita o verde de metilo, 20 mililitros de etanol al 95%, diez
mililitros de ácido acético glacial y 970 mililitros de agua destilada. Se debe
disolver primero los colorantes en el alcohol y después agregar el agua
destilada que contiene el ácido acético glacial. Permitir que la solución
madure por 24 horas y luego filtrar. Guardar en frasco ámbar
La solución II se prepara de la
siguiente manera: se disuelven seis coma sesenta y seis gramos de yodo más diez
gramos de ioduro de potasio en 1000 mililitros de agua destilada
Bibliografía
Brooks. G. J.; Butel. J. S. y Morse. S. A. (1999).
Microbiología médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. En B. G. F., & B. J.
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Castellano. G. M. J.;
Ginestre. P. M. M.; Ávila. R. Y. C.; Romero. A. S. C. y Perozo. M. A. J.
(2012). Manual práctico de Bacteriología General. 2da Edición (págs.
36,37). Maracaibo: Ediciones del Vicerrectorado Académico. Universidad del
Zulia.
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